配方2:葡萄糖5g 二水柠檬酸钠0.5g 蒸馏水100ml 青、链霉素适量。用于常温保存。
配方3:葡萄糖5g 二水柠檬酸钠0.5g 蒸馏水100ml 新鲜卵黄3ml 青、链霉素适量。用于常温保存或普通低温保存。
配方4:基础液:葡萄糖5g 二水柠檬酸钠0.3g EDTA0.1g 蒸馏水100ml;
稀释液为基础液95ml加入新鲜卵黄5ml,加青、链霉素各10万单位。用于常温保存或普通低温保存。
配方5:葡萄糖5g,二水柠檬酸钠0.3g,EDTA0.1g 蒸馏水100ml 卵黄7ml 青链霉素各10万单位。用于常温保存或低温保存(7-13℃)。
配方6:稀释粉和蒸馏水直接按比例配制而成。按稀释粉说明书使用。
3.2配制方法:用天平和量筒分别称量药物和水,溶解,消毒,降温至30℃左右时加入青链霉素,用灭菌纱布4层或二层绸子或定性快速滤纸过滤,备用。如用卵黄则再加入卵黄,充分混合即可。做到现用现配制。
3.3稀释液配好应及时贴上标签,标明品名、配制日期和时间、经手人等。工作结束时经常用棉球消毒冲洗天平盘
4、采精准备
4.1 采精台的制作:用一个直径为20厘米,长120厘米的园木,两端削成弧形,安装四条腿,在木头上面铺一层稻草或旧棉胎等有弹性的软物,外面包一层软胶皮或猪皮(亦可用铁支焊接为半园,四条腿能活动的采精台)。组装后采精台后高60厘米,前高50厘米。
4.2配置精液稀释液:配置好所需量的稀释液,置于在水浴锅中预热至35℃。
4.3精液质检设备的准备:调节好质检用的显微镜,开启显微镜载物台上恒温板以及预热精子密度测定仪。精液分装器件的准备:准备好精液分装器、精液瓶或袋等。
5、采精
5.1 采精应在室内进行。采精室应清洁无尘,安静无干扰,地面平坦不滑。
5.2 采精员穿戴洁净工作衣帽,长胶鞋, 胶手套,胶手套应先用75%酒精消毒、凉干,30分钟后使用。
5.3采精前,将公猪赶进采精预备室后,剪去公猪包皮周围长毛,用温开水清洗包皮周围并抹干,有条件时带上消毒手套;途手采精手需先洗净,消毒后用蒸馏水冲洗。
5.4 采精方法,主要用手采法。
采精时,采精员站于采精台的右(左)后侧,当公猪爬上采精台后,采精员随即蹲下,待公猪阴茎伸出时,用手握紧其阴茎龟头,特别是要抓住螺旋部分,压力不宜太大,以控制其龟头不能转动或回缩为限,并带有松紧节奏,以刺激射精。当公猪充分兴奋,龟头频频弹弹动时,表示将要射精。公猪开始射精时多为精清,不宜收集,待射出较浓稠的乳白色精液时,应立即以右(左)手持集精杯,放在稍离开阴茎龟头处将射出的精液收集于集精杯内。当射完第一次精后,刺激公猪射第二次, 继续接收。射完精后,待公猪退下采精台时, 采精员应顺势用左(右)手将阴茎送人包皮中(集精杯位置应高于包皮部,可防止包皮部液体流入集精杯内。)不得粗暴推下或抽打公猪。
5.5 采精频率:成年猪:隔日采精,紧张时有时一天一次也可;青年猪(1岁)和老年猪(4岁以上):每三天采一次。
6、精液检查
6.1 精液量、色泽、气味、PH值。公猪的射精量,一般为100-300毫升,正常精液的色泽为乳白色或灰白色,略有腥味,精液PH值为6.8-7.2。
6.2 精子浓度
6.2.1 精子浓度是指每毫升精液中含有精子数的多少。是确定稀释倍数的重要标准
6.2.2测定方法:
检查精子浓度用血球计数器计算。其方法是用白血球吸管吸取精液至刻度0.5处,再吸取3%氯化钠溶液至刻度101处,捏住吸管的两端充分振荡后,将吸管前部的滤体吹弃2-3滴,然后滴一小滴于计算玻板上盖玻片边缘,使其自行渗入计算室内,待液体稳定后,在400~600倍的显微镜下计数。观察计数时应数五个有代表性的中方格(计80个小方格)内的精子数,对头部压在方格四边线上的精子,只能计算两条边上的。每次要做2-3 遍,求其平均值。最后将精子总数乘以 10000,就得每立方毫米精液中所含精子数,再将此数乘以1000,便得每毫升精液的精子数。
6.3 精子活力
6.3.1 精子活力是指呈直线运动的精子所占百分率,在显微镜下观 察,一般按0.1~1.0的十级评分法估计,鲜精活力要求不低于0.7,检查活力时要求载玻片和盖玻片都应37℃预热。