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冻干精制人白细胞干扰素制造及检定试行规程

  1.2.5 溶解、透析或超滤,除菌过滤后进行半成品检定,合格后方可分装,冻干。
  1.2.6 半成品检定
  半成品应做理化检查和比活性测定,比活性应≥1×10(上标)6IU/mg蛋白。加入人白蛋白作保护剂后应做无菌试验,余毒试验、安全试验、硫氰酸钾残余量检查。
  1.2.7 冻干
  按《冻干健康人血浆制造及检定规程》1.5项进行,制品最高温度应不超过35℃。
  2.成品检定
 
 2.1 理化检查
  2.1.1 外观性状
  应为白色或淡黄色疏松体,加水溶解后为澄清液体,不应有摇不散的颗粒。
  2.1.2 水分测定
  按《生物制品化学检定规程》费休氏水分测定法进行,不得超过3%(g/g)。
  2.1.3 硫氰酸钾残余量测定
  取2滴干扰素原液加2滴9%三氯化铁溶液,不呈现微红色为合格。
  2.1.4 pH值
  pH值应为6.5~7.5。
  2.2 鉴别试验
  采用SDS-PAGE法,在分子量18000~20000之间应出现明显区带,并同时用免疫印迹法进一步证实为a干扰素区带。
  2.3 无菌试验
  按《生物制品无菌试验规程》进行。
  2.4 热原质试验
  按《生物制品热原质试验规程》进行。每只家兔静脉注射0.2ml(2×10(上标)5IU),按肌内注射制品判定标准判定结果。
  2.5 安全试验
  2.5.1 豚鼠试验
  取体重300~400g豚鼠2只,每只腹腔注射干扰素1ml(10(上标)6IU),观察7天,动物健存,每只体重增加者判为合格。如不符合上述要求,用4只豚鼠复试一次,判定标准同前。
  2.5.2 小白鼠试验
  取体重18~20g小白鼠5只,每只腹腔注射干扰素0.5ml(5×10(上标)5IU),半小时内动物不应有明显的异常反应。继续观察7天,动物均健存,每只体重增加者判为合格。如不符合上述要求,再用10只小白鼠复试一次,判定标准同前。
  2.6 余毒试验
  取9~10日龄鸡胚5只,于尿囊腔接种干扰素0.2ml(2×10(上标5IU),37℃培养48~72小时,取尿囊液做血凝试验,阴性者判为合格。
  2.7 HBsAg检测
  每安瓶冻干制品(1ml装)加0.1ml灭菌注射用水溶解后,用敏感性为3mg/ml以下的试剂盒测定,应为阴性。
  2.8 效价测定


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