(一)鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+L株)质量标准
鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+L株)
Jixinchengyi、Chuanranxingzhiqiguanyan、qinliugan(H9 yaxing)
Sanlianmiehuoyimiao(La Sota zhu+M41 zhu+L zhu)
Newcastle Disease,Infectious Bronchitis and Avain Influenza (Subtype H9) Vaccine,Inactivated(Strain La Sota + Strain M41 +Strain L)
本品系用鸡新城疫病毒La Sota株、鸡传染性支气管炎病毒M41株和A型禽流感病毒A/Chicken/Shandong/1/2002(H9N2)株(简称L株)分别接种易感鸡胚、收获感染胚液,超滤浓缩后经甲醛溶液灭活,与油佐剂混合乳化制成。用于预防鸡新城疫、鸡传染性支气管炎和H9亚型禽流感病毒引起的禽流感。
【性状】外观 乳白色乳剂。
剂型 油包水型。取一清洁吸管,吸取少量疫苗滴入冷水中,除第1滴外,均应不扩散。
稳定性 吸取疫苗10ml加入离心管中,以3000r/min离心15分钟,管底析出的水相应≤0.5ml。
黏度 按现行《中国兽药典》附录进行测定,应符合规定。
【装量检查】 按现行《中国兽药典》附录进行检验,应符合规定。
【无菌检验】 按现行《中国兽药典》附录进行检验,应无菌生长。
【安全检验】 用30~60日龄SPF鸡10只,每只肌肉或颈部皮下注射疫苗1ml,观察14日,应不出现由疫苗引起的任何局部和全身不良反应。
【效力检验】
1 鸡新城疫部分 采用血清学方法进行检验,结果不符合规定时,可采用免疫攻毒法进行检验。
(1)血清学方法 用30~60日龄SPF鸡15只,10只各颈部皮下或肌肉注射疫苗20µl,另5只作对照。接种后21~28日,每只鸡分别采血,分离血清,按现行《中国兽药典》方法进行HI抗体效价测定。免疫组HI抗体效价的几何平均值应不低于1:16 ,对照组HI抗体效价均应不高于1:4。
(2)免疫攻毒法 用30~60日龄SPF鸡15只,10只各皮下或肌肉注射疫苗20µl,另5只作对照。接种后21~28日,每只鸡分别肌肉注射鸡新城疫病毒北京株强毒(CVCC AV1611株)105.0ELD50,观察14日。对照组应全部死亡,免疫组应至少保护7只。
2 鸡传染性支气管炎部分 用14~42日龄SPF鸡10只,各点眼、滴鼻接种传染性支气管炎活疫苗(H120株)1羽份(0.05ml)。接种后21日,分别采血,分离血清,再肌肉接种三联灭活疫苗0.3ml,二免后21~28日再分别采血,分离血清。将两次血清分别测HI效价(见附注1)。二免血清的HI效价几何平均值应比首免血清HI效价几何平均值高3倍以上。
3 H9亚型禽流感部分 血清学方法和免疫攻毒方法,二者任择其一。
(1) 血清学方法 用28~35日龄SPF鸡15只,10只各皮下或肌肉注射疫苗0.3ml,另5只作对照。接种后21日,每只鸡分别采血,分离血清,测定HI抗体效价(见附注2)。免疫组HI抗体效价的几何平均值应不低于1:64,对照组HI抗体效价均应不高于1:4。
(2) 免疫攻毒法 将上述免疫鸡和对照鸡,用1:10稀释的禽流感病毒(H9亚型)L株进行静脉注射,每只鸡0.2ml(约含2×106.0EID50)。攻毒后第5日,采集每只鸡的泄殖腔拭子,经处理后,分别经尿囊腔接种9~11日龄SPF鸡胚5个,每胚0.2ml,孵育观察5日,无论死胚、活胚均应测定鸡胚液血凝价,每个拭子样品接种的5个鸡胚中只要有1个鸡胚的鸡胚液的血凝价不低于1:16(微量法),即可判为病毒分离阳性。对病毒分离阴性的样品,应盲传一次后再进行判定。免疫组应至少有9只鸡为病毒分离阴性,对照组应至少4只鸡病毒分离阳性。
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