5.4 定期检查
加强对乳房炎的监控,每月对每头泌乳牛进行奶牛乳房炎检测。
5.5 干奶期预防
干奶前首先进行隐性乳房炎检测,阴性奶牛方可进行干奶。提倡一次性干奶。乳汁挤净后,向每个乳区注入适量的干奶药。
附件1
金黄色葡萄球菌的检验
1 主要试剂和试验方法:
1.1 革兰氏染色:
1.1.1涂片、火焰固定。
1.1.2草酸铵结晶紫染1min。
草酸铵结晶紫染液的配制:
溶液A:结晶紫2g,95%酒精20mL,溶液B:草酸铵0.8g,蒸馏水80mL。将A、B溶液混合,用滤纸过滤后即可使用。
1.1.3自来水冲洗。
1.1.4加碘液覆盖涂面染约1min。
1.1.5水洗,用吸水纸吸去水分。
1.1.6加95%酒精数滴,并轻轻摇动进行脱色,20s后水洗,吸去水分。
1.1.7沙黄液(稀)染2min后,自来水冲洗。干燥,镜检。
革兰氏阳性菌染色为蓝色,革兰氏阴性菌染色为红色。
1.2 触酶试验:取槽置于洁净的试管内或玻片上,然后加3%过氧化氢数滴;或直接滴加3%过氧化氢于不含血液的细菌培养物中,立即观察结果。有大量气泡产生者为阳性,无则为阴性。
1.3 血浆凝固酶试验:吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌浸液肉汤24h培养物充分混匀,置36±1°C培养,每隔半小时观察一次,连续观察6h,出现凝固,即将小试管倾斜或倒置时,内容物不流动,判为阳性。同时做阴阳性对照。
2 乳样的采集
选取出现临床症状(或者怀疑为亚临床型乳房炎)乳房炎奶牛,先用温水,再用0.2%新洁尔灭擦洗乳房,最后用70%的酒精擦拭乳头。采样者同时进行手指擦拭消毒。每个乳室先挤去头2~3把奶,以排除污染的杂菌,每头奶牛取乳样5mL于无菌乳样杯中,待检。
3 病原菌的分离培养
初步诊断:将少量乳汁涂片、革兰氏染色、镜检。如可见圆球形革兰氏阳性细菌可怀疑为葡萄球菌。
分离培养:将乳样摇匀,分别取适量接种于营养肉汤(10%血清)、鲜血琼脂、麦康凯琼脂培养基(平板)后,置于37℃温箱培养24~48h。观察每个平板中细菌生长的情况,记录菌落生长表现。
普通琼脂平板上,37℃,24~72h培养后,可见到湿润、光滑、隆起的圆形金黄色菌落。挑取典型菌落涂片、染色、镜检(镜检呈葡萄状排列,无芽胞、荚膜,直径0.5~1μm,革兰氏染色阳性),并挑取单个可疑菌落移植于肉汤和斜面培养基,经37℃培养24~48h。24h后没有长菌的平板,再用相应的增菌肉汤涂划一次,继续培养,24~48h后,再作检查,以防漏检。将剩余的乳样存放于4℃冰箱内备用。
营养肉汤中呈浑浊生长,管底有少量灰白色沉淀;
血液琼脂平板中菌落较大,呈金黄色、圆形,周围出现明显的β-溶血。
4 生化鉴定
触酶试验:触酶阳性
血浆凝固酶试验:凝固酶试验阳性
糖发酵试验:能分解甘露醇、乳糖 、葡萄糖、麦芽糖、蔗糖