附件2
血清学检测方法
一、快速免疫色谱试验（ICT）检测班氏丝虫抗原
（一）试剂盒内容物（置4℃可保存6个月）：含测试卡和100µl刻度毛细管。
（二）血样：全血100µl。
（三）操作步骤。
1.打开测试卡， 移去并丢弃粘胶衬里， 确保卡的右手边缘粘胶是暴露的。
2.利用毛细管的虹吸作用，从耳垂或手指取血，使毛细管内血量吸至100µl刻度线。
3.将100µl全血从毛细管加到测试卡粉红色和白色垫的顶部。注意每一滴血完全吸收后再加第2滴。如毛细管内的血滴出不畅，可将管尖轻按垫子。
4.等垫子的粉红色部分完全浸透血清（约需30秒～1分钟）后关闭测试卡。如在1分钟～2分钟垫子的粉红色部分仍未能浸透血清，应加1滴试剂。用力压紧测试卡视窗右边区域，并开始计时。
（四）结果判断标准。
关闭测试卡2分钟后，通过测试卡视窗读结果。若在视窗内见到2条线（对照线和测试线），则结果为阳性；如只有对照线显示，则结果为阴性。如是弱阳性血样，可延长显示时间至关闭测试卡15分钟时再做记录，以确定结果。如果对照线不显示，则测试无效，应当重新进行测试。读卡时间最长限在15分钟，长时间放置，阴性多会变成阳性。
注：ICT测试卡不适用于检测马来丝虫病。
二、ELISA检测丝虫特异IgG4抗体试验
（一）试剂盒内容物（置4℃可保存6个月）：含丝虫抗原包被板、抗人IgG4酶结合物、洗涤剂干粉、底物稀释液、底物干粉、反应终止液、阴性对照、阳性对照。
（二）血样（血清或滤纸血）
1.血清：采集受检者的静脉血或末梢血，离心后收集血清。在低温下运送，4℃保存，-20℃可长期保存。
2.滤纸血：以洁净滤纸沾取自然流出的一滴耳垂或手指血（约20µl），血斑直径应在1.1 cm～1.2cm，厚薄均匀。自然干燥后密封置4℃保存（可保存约6个月）。
（三）操作步骤。
1.将每袋洗涤剂干粉用500ml蒸馏水溶解作反应板洗涤液和样品稀释液用。血清样本按1：40稀释，滤纸血样本按直径1.1cm圆片加400µl样本稀释液，37℃浸泡2小时（或4℃过夜）稀释处理。
2.取已稀释的样本100µl加入反应板孔内，同时设阴性、阳性对照（阴、阳性对照已稀释，直接加入100µl）及空白对照（加100µl样本稀释液）各1孔，37℃反应90分钟后甩去孔内液体，用洗涤液加满各孔，静置30秒后甩去，共洗5次，最后一次拍干。
3.除空白对照孔外每孔加抗人IgG4酶结合物2滴，37℃反应90分钟后甩干孔内液体。同上洗涤。
4.将底物干粉完全溶解于底物稀释液中（底物溶解后4℃避光可保存1周），各孔加入底物溶液2滴，37℃30分钟后加1滴终止液终止反应，混匀，观察结果。
（四）结果判断标准
1.肉眼观察：当阴性对照孔无色或显微黄色，阳性对照孔呈明显黄色时，试验有效。待检样品孔颜色呈明显深于阴性对照的黄色即判为阳性。
2.仪器检测：应用酶标仪以空白对照孔调零，在波长405nm处读取各孔OD值。以样本OD≥阴性对照OD值的2.1倍为阳性，若阴性对照OD值不足0.07，按0.07计算。
注：IgG4抗体试验适用于检测班氏丝虫和马来丝虫病。
附件3
丝虫病个案调查表
一、一般情况
姓名：
；性别：
；出生年月：
年
月。
固定电话：
；手机：
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