各级各类医疗机构负责病例的报告和管理。
附件:1.病原学检测方法(厚血膜法)
2.血清学检测方法
3.丝虫病个案调查表
4.蚊媒分类调查表
5.蚊媒幼丝虫自然感染调查表
附件1
病原学检测方法
(厚血膜法)
一、血片制作
于晚9时至翌晨2时,以皮肤消毒剂消毒耳垂(或指端)待干,用一次性采血针快速深刺,取血6大滴,约等于120μl,涂于2张玻片,制成边缘整齐、厚薄均匀的椭圆形厚血膜(约长3cm、宽1.5cm),平放于有盖的玻片盒内。
二、血片染色
将经自然干燥的血片放入清水中溶血5分钟~10分钟,至血膜呈乳白色,取出晾干,用甲醇固定,染色。大规模普查可用硼砂美蓝染色,鉴定虫种或保存标本宜用吉氏液或苏木素染色。
(一)硼砂美蓝染色法。取美蓝2g,硼砂3g,置研钵内,边研边加水,待溶解后冲洗入瓶中,加蒸馏水100ml配成原液,过滤后放置备用。染色时取原液5ml加清水配成5%稀释液,染3分钟~5分钟,使血膜呈天蓝色,然后用清水轻轻冲洗。本法染色前可不必先溶血、固定。
(二)吉氏染色法。染液由吉氏粉0.5g,中性甘油25ml及甲醇25ml配成。先置染粉于研钵内,加少量甘油充分研磨,边研边加,至甘油加完为止,然后移入带玻璃塞的100ml玻塞瓶内,用甲醇小量多次洗涤甘油染液移入瓶内,盖紧瓶盖,充分摇匀,置于55℃-60℃温箱内24小时或室温下3天-5天,即为原液,放置愈久染色效果愈佳,临用时稀释。将溶血后已干的血片用甲醇固定约1分钟,然后滴加10%染液(原液加清水稀释配成)染色45分钟,用蒸馏水轻轻冲洗。
(三)德氏苏木素染色法。染液由A液即铵明矾饱和液(铵明钒20g、蒸馏水100ml)、B液(苏木素结晶1g加纯酒精10ml)、C液(甘油25ml加甲醇25ml)配成。将B液逐滴加入A液中,倒入一不盖紧的容器内,置于空气流通处,经2周至1个月使其充分氧化,过滤后加入C液,密封备用。血片溶血、固定步骤同前。用上述染液染色10分钟~20分钟,用0.05%-0.1%稀盐酸脱色片刻,流水冲洗至血膜呈蓝色。
三、血片镜检
将染色的血片在低倍显微镜下顺序逐个视野检查微丝蚴并计数,根据微丝蚴的大小、体态、折光性、有无鞘膜、表皮是否光滑及内部结构等特征,予以确定。在高倍镜下观察微丝蚴的体核及头端空隙、神经环、排泄细胞、排泄孔、肛孔、尾核等结构,以鉴别班氏和马来微丝蚴。必要时用油镜作进一步鉴别。
四、班氏与马来微丝蚴形态鉴别要点
特 征
| 班氏微丝蚴
| 马来微丝蚴
|
长度(μm)
| 244~296(平均260)
| 177~230(平均220)
|
宽度(μm)
| 5.3~7.0
| 5.0~6.0
|
体态
| 柔和,弯曲自然,无小弯
| 僵直,大弯上有小弯
|
头端空隙(长宽比)
| 较短(1 :1)
| 较长(2 :1)
|
体核
| 圆形,排列整齐,各核分开,清晰可数
| 卵圆形,大小不等,排列紧密,常相互重叠,不易分清
|
尾核
| 无
| 2个
|