5.1 样品预处理
准确称取样品约1.0g(精确至0.001g),置于50mL量瓶中,加磺基丁二酸钠二辛酯溶液(3.5)约40mL,常温超声提取15min,用磺基丁二酸钠二辛酯溶液(3.5)定容,摇匀。必要时可离心,取上清液经0.45μm 滤膜过滤,续滤液作为待测溶液备用。
5.2 测定
5.2.1 色谱参考条件
5.2.1.1 色谱柱:C18 柱,250mm×4.6mm,5μm;
5.2.1.2 流动相:磺基丁二酸钠二辛酯溶液(3.5);
5.2.1.3 流速:1.0mL/min;
5.2.1.4 检测波长:280nm;
5.2.1.5 柱温:室温。
5.2.2 校准曲线的制备
分别移取米诺地尔标准储备溶液(3.6)0.20mL、1.00mL、5.00 mL、10.00 mL、20.00mL置于50mL量瓶中,用磺基丁二酸钠二辛酯溶液(3.5)定容,摇匀。配成含米诺地尔分别为1、5、25、50、100μg/mL 的标准溶液。在设定的色谱条件下,分别精密量取10μL 注入高效液相色谱仪,记录色谱图,并绘制峰面积-米诺地尔浓度(μg/mL)校准曲线,线性相关系数不小于0.999。
5.2.3 样品测定
在设定的色谱条件下,精密量取10μL 待测溶液注入高效液相色谱仪分析。若样品中米诺地尔含量超过100μg/mL,应用磺基丁二酸钠二辛酯溶液(3.5)适当稀释后测定,记录色谱图,根据峰面积,以校准曲线计算待测溶液中米诺地尔的质量浓度。按以上步骤取两份样品进行平行试验,并计算相对平均偏差(≤10%)。
6 计算
P×V
ω(米诺地尔)=------------
...
式中:ω(米诺地尔)-样品中米诺地尔的质量分数,μg/g;
ρ-从校准曲线上查得的待测溶液中米诺地尔的质量浓度,μg/mL;
V-样品定容体积,mL;
m-样品取样量,g。
7 色谱图
图1 米诺地尔标准溶液(25μg/mL)色谱图(略)
8 阳性结果的确认
测定过程中,如果有阳性结果,应采用液相色谱-质谱法进一步确证(参见附录)。
附录:
液相色谱-质谱法
1 范围
本附录适用于上述液相色谱法检出化妆品中米诺地尔的确证。
2 仪器设备