6.3 样品的测定
按照下列顺序分别将青霉素标准溶液 (4.4.1)、β-内酰胺酶标准溶液(4.4.2)、舒巴坦标准溶液(4.4.3)加入到样品(6.1)及纯水(6.1)中:
A 青霉素5μL。
B 舒巴坦25μL、青霉素5μL。
C β-内酰胺酶25μL、青霉素G5μL。
D β-内酰胺酶25μL、舒巴坦25μL、青霉素5μL。
并将上述A~D试样各200μL加入放置于 6.2上的4个8 mm钢管中,(36±1)℃培养培养 18~22h,测量抑菌圈直径。每个样品,取三次平行试验平均值。
7 结果报告
纯水样品结果应为:(A)、(B)、(D)均应产生抑菌圈;(A)的抑菌圈与(B)的抑菌圈相比,差异在3mm以内(含3mm),且重复性良好;(C)的抑菌圈小于(D)的抑菌圈,差异在3 mm以上(含3 mm),且重复性良好。如为此结果,则系统成立,可对样品结果进行如下判定。
7.1 如果样品结果中(B)和(D)均产生抑菌圈,且(C)与(D)抑菌圈差异在3 mm以上(含3mm)时,可按7.1.1、7.1.2判定结果。
7.1.1 (A)的抑菌圈小于(B)的抑菌圈差异在3 mm以上(含3mm),且重复性良好,应判定该试样添加有β-内酰胺酶,报告β-内酰胺酶类药物检验结果阳性。
7.1.2 (A)的抑菌圈同(B)的抑菌圈差异小于3 mm,且重复性良好,应判定该试样未添加有β-内酰胺酶,报告β-内酰胺酶类药物检验结果阴性。
7.2 如果(A)和(B)均不产生抑菌圈,应将样品稀释后再进行检测。
附录A
(规范性附录)
培 养 基
A.1 营养琼脂
┌───────────────────────┬──────────────────────┐
│蛋白胨 │10 g │
├───────────────────────┼──────────────────────┤
│牛肉膏 │3 g │
├───────────────────────┼──────────────────────┤
│ │ │
│氯化钠 │ 5 g │
├───────────────────────┼──────────────────────┤
│ 琼脂 │ 15-20g │
├───────────────────────┼──────────────────────┤
│ 蒸馏水 │ 1 000 mL │
└───────────────────────┴──────────────────────┘